一、CTAB提取dna,那個DNA提取液中 有絮狀沉淀?什么原因?
有可能是DNA提得好,也有可能是雜質(zhì)太多~~~有必要的話,可以之后用分光光度計測一下質(zhì)量。一般基因的PCR是沒有問題了。當然,有的時候pcr不出來可能會是由于你的DNA的原因,一是你DNA提得好,濃度高,你加多了,少加點兒模板試試;二是,你的基因要求高,或者你的DNA雜質(zhì)確實很多,需要重新純化一下。所以如果你是新手建議你可以在頭幾次抽提之后,用分光光度計檢測一下,很快的。以后有經(jīng)驗就好些了~~~
二、CTAB法提取DNA,有大量絮狀沉淀,電泳DNA帶弱,點樣孔不亮,不是蛋白,會是多糖嗎?怎么辦
(1)盡可能采用新鮮無損傷的幼葉,在與提取緩沖液接觸前,應(yīng)防止冰凍的樣品在空氣中融化,否則酚類易被氧化。同時采用液氮研磨,盡可能磨細、磨勻,且時間不能太長。(2)在加裂解液前,先加入冷凍的提取緩沖液(內(nèi)含3%的 PVP 及 2%β-巰基乙醇),可除去部分雜質(zhì)和多糖,且 PVP 可以和多酚類物質(zhì)結(jié)合形成復(fù)合物,防止多酚物質(zhì)氧化成醌類,同時 PVP 能有效去除多糖,從而降低酚類物質(zhì)以及多糖對 DNA 的影響。(3)適當提高提取緩沖液中SDS(2.5%)的濃度,使 SDS 與糖充分結(jié)合,通過高速離心除去。
三、pcr產(chǎn)物里有白色沉淀是怎么回事是絮狀沉
pcr產(chǎn)物里有白色沉淀是怎么回事是絮狀沉
1.是不是ep管的塑料啊,質(zhì)量不好的ep管可能受熱塑料脫落了;
2.擴增產(chǎn)物dna析出了,可能性較小;
3.你的reaction buffer加多了,鹽析出來了,這個可能性不大.
你是要看支原體污染?我覺得是血清里的蛋白變性析出了,不用管啊,看dna的結(jié)果就可以了
四、DNA快速提取中加入異丙醇之后的絮狀沉淀是什么???
DNA快速提取中加入異丙醇之后的絮狀沉淀是什么?
沒有關(guān)系,即使看不到用少量水溶解后還是可以用得。實在不放心就去1ul或更少量跑個瓊脂糖電泳。